Методы исследования

Исследования, которые показаны в первую очередь

.
Результат
.

Это исследование должно назначаться всем пациентам с подозрением на инфекцию, вызываемую вирусом Эбола, в то время как пациент должен быть изолирован.[89]

Результат готов за 24–48 часов до момента проведения диагностики методом ELISA.

В продаже имеются несколько различных коммерческих наборов для ПЦР с различной чувствительностью, специфичностью и пределами обнаружения.[90]

В условиях медучреждений Запада, исследование можно провести в региональных или национальных лабораториях, оборудованных на уровне биологической безопасности 4 категории.[10] В эпидемических условиях и в некоторых странах лаборатории 4 уровня биологической безопасности размещаются локально, и результаты доступны через 4 часа после прибытия туда образцов для анализа.

Вирусную РНК можно выявить в крови пациента с помощью ОТ-ПЦР, начиная с 3-х и по 6-17 сутки с момента появления симптомов. Положительный результат ПЦР означает, что пациент является потенциально инфицированным, особенно в случае наличия у него или у нее активной диареи, рвоты или кровотечения.

В случае отрицательного результата исследование следует повторить в течение 48 часов, поскольку первичная вирусная нагрузка может быть низкой и не улавливаться в начале развития заболевания. В случае отрицательного результата, но при сильном подозрении на данную инфекцию, исследование следует повторить, чтобы исключить диагноз (или подтвердить купирование инфекции).[89]

Более высокая вирусная нагрузка коррелирует с неблагоприятным исходом и повышенной смертностью.[20][21][22][61][74][89][91]

Результат

положительный результат свидетельствует об определении РНК вируса Эбола

.
Результат
.

Окрашивание толстой капли и тонкого мазка крови по Гимзе и быстрые диагностические тесты являются исследованиями, которым следует отдавать предпочтение при скрининге на малярию.

Отрицательный результат в соответствующем эпидемиологическом контексте повышает вероятность инфекции, вызываемой вирусом Эбола; однако, коинфекция с малярией наблюдалась у 5% пациентов в Западной Африке во время вспышки 2014 года, поэтому вероятность возникновения двойной инфекции должна проверяться у всех пациентов.[74]

Результат

результат должен быть отрицательным (может быть положительным при коинфекции)

Исследования, проведение которых нужно рассмотреть

.
Результат
.

Важно назначать этот анализ (при возможности) в районах, где проведение других исследований ограничено.

Могут свидетельствовать об остром поражении почек.[93]

Особенно важно определение этих показателей у пациентов с диареей и рвотой.

Во время вспышки 2014 года гипокалиемия или гиперкалиемия, возникающие вследствие рвоты, диареи или острого поражения почек, наблюдались приблизительно в 33% случаев.[74]

Гипокальциемия ассоциируется с летальным исходом инфекции.[16]

Целесообразно при проведении коррекции электролитов и инфузионной терапии.

Результат

может отличаться от нормы

.
Результат
.

Важно назначать этот анализ (при возможности) в районах, где проведение других исследований ограничено.

Может указывать на острое поражение почек, которое было распространенным явлением во время вспышки 2014 года,[22][93] и ассоциировалось с летальным исходом.[74]

Особенно важно определение этих показателей у пациентов с диареей и рвотой.

Результат

может быть повышено

.
Результат
.

Важно назначать этот анализ (при возможности) в районах, где проведение других исследований ограничено.

Повышенный уровень лактата является показателем (маркером) гипоперфузии тканей и индикатором развития шока. У пациентов с острым возникновением заболевания и признаками сепсиса этот анализ полезен для определения степени системной гипоперфузии, он помогает управлять регидратацией путем корректировки инфузионной терапии.[94]

Повышенный уровень лактата был одним из индикаторов обусловленного грамнегативными бактериями сепсиса, установленного на 15 день у пациента, находившегося на лечении в Германии.[37]

Результат

вариабельный

.
Результат
.

У пациентов с острым развитием заболевания и признаками сепсиса полезно определять pH артериальной и венозной крови, а также уровень бикарбоната для определения степени системной гипоперфузии и для управления регидратацией путем корректировки инфузионной терапии.[94]

Результат

вариабельный

.
Результат
.

Снижение числа тромбоцитов и выраженная лимфопения могут наблюдаться на начальных стадиях инфекции, однако это не является диагностическим критериям. Часто такое явление, наряду с нормализацией тромбоцитопении, наблюдается после нейтрофильного лейкоцитоза на более поздних стадиях инфекции у пациентов, которые в конце концов спонтанно выздоравливали. Может сохраняться лейкоцитоз со сдвигом влево[16]

У пациентов с тяжелой формой заболевания может наблюдаться прогрессирующая тромбоцитопения как проявление диссеминированного внутрисосудистого свертывания (ДВС).

Во время вспышки 2014 года пониженные уровни гемоглобина были зарегистрированы у 24% пациентов,[74] а при предыдущих вспышках такие уровни часто были связаны с кровотечением.[16]

Результат

тромбоцитопения, выраженная лимфопения; снижение уровня гемоглобина (при проявлениях кровотечения)

.
Результат
.

Пролонгированное протромбиновое время или активированное частичное тромбопластиновое время связаны с более тяжелой формой инфекции и проявлениями кровотечения, такими как ДВС-синдром.

Кроме того, было установлено, что у пациентов со смертельными случаями инфекции уровни D-димера на 6–8 день заболевания были в четыре раза выше, чем у тех пациентов, которые выжили.[95]

Результат

пролонгированные показатели ПТВ или аЧТВ, повышенный уровень D-димера (при проявлениях кровотечения)

.
Результат
.

Гематурия и протеинурия могут наблюдаться при тяжелой форме заболевания.[16]

Олигурия, не отвечающая на регидратацию, является плохим прогностическим признаком.

Результат

может показать наличие гематурии или протеинурии

.
Результат
.

Показатели АЛТ и АСТ, как правило, повышены; однако большинство исследований показывают, что повышение АСТ возникает не пропорционально повышению АЛТ, что наводит скорее на мысль о системном повреждении тканей, чем о гепатоцеллюлярном поражении.[74]

Соотношение AСT: AЛT на 6–8 день развития инфекции достигало максимального показателя 15:1 в смертельных случаях, в отличие от несмертельных случаев, при которых пиковый показатель составлял 5:1.[8][16][95]

Показатели билирубина, ГГТ (гамма-глутамилтрансферазы) и ЩФ (щелочной фосфатазы) часто находятся в норме или незначительно повышены. Значительное повышение AЛT при тяжелой форме желтухи указывает на альтернативный диагноз (например, вирусный гепатит).

Результат

высокий показатель отношения АСТ: AЛT; уровни билирубина, ГГТ и ЩФ могут быть незначительно повышены

.
Результат
.

О повышенных уровнях этого показателя сообщалось в нескольких исследованиях, он указывает на наличие панкреатита, что является признаком тяжелой инфекции.[16]

Результат

может быть повышено

.
Результат
.

У взрослых может наблюдаться гипогликемия, но обычно об этом не сообщается.[22] Однако это явление широко распространено среди детей и может иметь тяжелую форму. Это является потенциальной обратимой причиной спутанности сознания.[82][83]

Результат

может быть слабой

.
Результат
.

Отрицательные результаты бактериологических исследований крови являются полезными, поскольку помогают исключить другие, невирусные причины инфекции (например, сепсис, кишечную инфекцию).

Грамотрицательная бактериемия, предположительно вследствие бактериальной транслокации из кишечника, у двух пациентов была идентифицирована как осложнение течения заболевания.[96][37] Однако в исследовании, которое проводилось в Сьерра-Леоне, где образцы крови для бактериологических посевов брали у пациентов при госпитализации в медицинский центр по лечению болезни, вызванной вирусом Эбола, было показано, что только один результат из 22 бактериологических исследований был положительным.[97]

Забор крови на бактериологическое исследование следует проводить на исходном уровне – при поступлении и/или при появлении желудочно-кишечных симптомов, либо при другом клиническом проявлении ухудшения состояния.

Результат

негативные

.
Результат
.

Это полезный диагностический анализ с высокой специфичностью; однако он не везде доступен. Это исследование может использоваться для подтверждения диагноза вместе с положительным результатом ОТ-ПЦР.

Он с наибольшей вероятностью дает положительный результат, начиная с 3 и до 6 дня инфекции, но его результаты могут широко варьировать, начиная с 7 и до 16 дня болезни.[42]

Результат

положительный результат свидетельствует о присутствии антител к вирусу Эбола

.
Результат
.

Показательны на более поздних стадиях развития инфекции.

IgM-антитела могут появиться в сыворотке крови уже на 2 день после начала развития инфекции, но вплоть до 9 дня результаты могут варьировать. Результат их анализа становится отрицательным в период между 30 и 168 днем от начала появления симптомов. Иммунный ответ за счет IgG формируется на 6-18 сутки и может сохраняться в течение нескольких лет.[42]

Положительный результат анализа на IgM или повышение титра IgG является явным доказательством недавно перенесенной инфекции, вызываемой вирусом Эбола.

Результат

результат положительный

.
Результат
.

Исследование показано для пациентов с респираторными симптомами.

Инфильтраты в легких не являются типичным явлением при инфекции и указывают на альтернативный (или сопутствующий) диагноз.

Могут возникнуть сложности при проведении рентгенографии в изоляторе, поэтому ее нужно назначать продуманно, чтобы избежать инфицирования.[98]

Результат

негативные

Неотложные исследования

.
Результат
.

Проблема с проведением быстрой ПЦР-диагностики для выявления инфекции, вызываемой вирусом Эбола, остается основным препятствием для эффективной, направленной изоляции страдающих этим заболеванием пациентов. Выполнение текущих диагностических тестов занимает, в среднем, 4 часа в полностью оборудованной лаборатории, которая находится рядом, но в отдаленные районы результаты тестирования могут прибыть через несколько дней. Это значит, что пока не будет получен их отрицательный результат диагностики, пациенты в лихорадочном состоянии с другими заболеваниями, а не с инфекцией, вызванной вирусом Эбола, будут находиться в изоляторе и часто невольно могут контактировать с вирусом.

Поэтому экспресс-тесты у постели больного могут внести значительный вклад в сферу борьбы с внутрибольничной инфекцией в медицинских центрах.

В настоящее время ВОЗ проводит оценку нескольких различных технологий для использования в полевых условиях. Они включают в себя многочисленные анализы на основе ОТ-ПЦР, которые были упрощены для использования с более коротким временем оборачиваемости <1 часа. ВОЗ зарегистрировала диагностический набор ReEBOV™ Antigen Rapid Test Kit (тест-набор для экспресс-анализа на антиген вируса Эбола) для потенциального использования; однако, данный тест рекомендуется к использованию только в специальных ситуациях. World Health Organization (WHO): interim guidance on the use of rapid Ebola antigen detection tests external link opens in a new window

Альтернативами являются тесты для выявления антигенов на основе ELISA, которые могут быть быстрее и проще, причем их преимуществом является потребность только в одной капле крови. Их основным недостатком является сниженная чувствительность, особенно на начальных стадиях заболевания.[99]

Технология нанопорового анализа может обеспечить быстрое обнаружение и секвенирование (определение генетической последовательности) при наличии очень низкого уровня вируса и потенциально может функционировать в рабочем состоянии с использованием набора для обнаружения карманного размера.[101][102][103]

Диагностический инструмент GeneXpert® (Xpert® Ebola) для анализа генома был опробован в полевых условиях, он представляет собой автоматизированную систему на основе картриджей, которая требует минимальных лабораторных навыков. Инактивированный образец помещается в одноразовый картридж, который затем вводится в закрытую машину. Подготовка проб, амплификация нуклеиновых кислот и их обнаружение, а также получение результата – это автоматизированные процессы, минимизирующие требования к обучению персонала, риск заражения инфекцией и перекрестное загрязнение материала.[104]Данное исследование применялось в полевых условиях во время вспышки в Демократической Республике Конго в 2018 году.

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США одобрило одноразовый экспресс-тест для обнаружения эболавируса Заира. Это второй экспресс-тест крови из пальца на антиген, доступный при разрешении на использование в чрезвычайных ситуациях, но он первый, в котором используют портативный считыватель с батарейным питанием, который может предоставлять результаты вне лабораторий.[106]Также был одобрен одноразовый экспресс-тест на антиген OraQuick® Ebola для обнаружения антигенов к вирусу Эбола в крови некоторых живых людей, а также в образцах некоторых недавно умерших людей, предположительно умерших от лихорадки Эбола (трупная жидкость ротовой полости). Это первый диагностический экспресс-тест, продаваемый в США, который позволяет быстро поставить предварительный диагноз, который впоследствии должен быть подтвержден.[107]

Данная сфера быстро развивается, при этом различные диагностические наборы утверждаются соответственно требованиям страны и условиям, в которых они будут использоваться. Управление продовольствия и медикаментов (УПМ/FDA) и ВОЗ разработали следующие рекомендации: World Health Organization (WHO): Ebola vaccines, therapies, and diagnostics external link opens in a new window Food and Drug Administration (FDA): 2014 Ebola virus emergency use authorizations external link opens in a new window

Результат

положительный результат свидетельствует о наличии вируса Эбола

Использование этого контента попадает под действие нашего заявления об отказе от ответственности